Нефелометрия в какво се състои и приложения
на нефелометрия се състои в измерване на радиацията, причинена от частици (в разтвор или в суспензия), като по този начин се измерва мощността на разпръснатото лъчение под ъгъл, различен от посоката на падащото излъчване..
Когато частица в суспензия се достигне с лъч светлина, има част от светлината, която се отразява, друга част се абсорбира, друга част се отклонява и останалото се предава. Ето защо, когато светлината удари прозрачна среда, в която има суспензия от твърди частици, суспензията се наблюдава мътна.
индекс
- 1 Какво представлява нефелометрията??
- 1.1 Дисперсия на радиация от частици в разтвор
- 1.2 Нефелометър
- 1.3 Отклонения
- 1.4 Метрологични характеристики
- 2 Приложения
- 2.1 Откриване на имунни комплекси
- 2.2 Други приложения
- 3 Препратки
Какво е нефелометрия??
Дисперсия на радиация от частици в разтвор
В момента, в който светлинният лъч удари частиците на вещество в суспензия, посоката на разпространение на лъча променя посоката си. Този ефект зависи от следните аспекти:
1.Размери на частиците (размер и форма).
2. Характеристики на суспензията (концентрацията) \ t.
3. Дължина на вълната и интензивност на светлината.
4. Разстояние на падащата светлина.
5. Ъгъл на откриване.
6. Индекс на пречупване на средата.
нефелометъра
Нефелометърът е инструмент, използван за измерване на частици, суспендирани в течна проба или в газ. Така фотоклетката, поставена под ъгъл от 90 ° по отношение на светлинен източник, открива радиацията от присъстващите частици в суспензията.
Също така светлината, отразена от частиците към фотоклетката, зависи от плътността на частиците. Диаграма 1 представя основните компоненти, които съставляват нефелометър:
А. Източник на радиация
При нефелометрията е жизнено важно да има източник на излъчване с висока светлинна мощност. Има различни типове, вариращи от ксенонови лампи и живачни лампи, волфрамови халогенни лампи, лазерни лъчи и др..
B. Монохроматорна система
Тази система е разположена между източника на излъчване и кюветата, така че по този начин се избягва падането на кюветата на излъчване с различни дължини на вълната в сравнение с желаното излъчване..
В противен случай, флуоресцентните реакции или топлинните ефекти в разтвора биха предизвикали отклонения от измерването.
C. Четяща кювета
Това е общопризматичен или цилиндричен контейнер и може да има различни размери. В това е решението в изследването.
D. детектор
Детекторът е разположен на определено разстояние (обикновено много близо до резервоара) и е отговорен за откриване на излъчването, разпръснато от частиците на суспензията..
E. Система за четене
Обикновено това е електронна машина, която приема, преобразува и обработва данни, които в този случай са измерванията, получени от проведеното изследване.
отклонения
Всяко измерване подлежи на процент грешки, който се дава главно от:
Замърсени кофи: в кюветите всеки агент, който е външен от разтвора за изследване, който е вътре или извън кюветата, намалява лъчистата светлина по пътя към детектора (дефектни кювети, прах, залепен за стените на кюветата).
смущения: наличието на някакъв микробен замърсител или мътност разсейва лъчистата енергия, увеличавайки интензивността на дисперсията.
Флуоресцентни съединенияТова са съединения, които при възбуждане от падащо излъчване причиняват погрешни и високи показания за плътност на дисперсията.
Опазване на реактивите: неадекватната температура на системата може да предизвика неблагоприятни условия за изследването и да подтикне наличието на мътни реагенти или утайки.
Колебания на електрическата енергия: за да се избегне падащото излъчване да е източник на грешка, се препоръчва стабилизатори на напрежението за равномерно излъчване.
Метрологични характеристики
Тъй като лъчистата мощност на откритата радиация е пряко пропорционална на масовата концентрация на частиците, нефелометричните изследвания имат по-висока метрологична чувствителност, отколкото други подобни методи (като турбидиметрия)..
В допълнение, тази техника изисква разредени разтвори. Това позволява да се минимизират както абсорбционните, така и отразяващи явления.
приложения
Нефелометричните изследвания заемат много важно място в клиничните лаборатории. Приложенията варират от определяне на имуноглобулини и протеини на остра фаза, комплемент и коагулация.
Откриване на имунни комплекси
Когато биологичната проба съдържа антиген, който представлява интерес, той се смесва (в буферен разтвор) с антитяло за образуване на имунен комплекс.
Нефелометрията измерва количеството светлина, което е разпръснато от реакцията антиген-антитяло (Ag-Ac), и по този начин се откриват имунни комплекси..
Това изследване може да се проведе по два метода:
Нефелометрия на крайната точка:
Тази техника може да се използва за анализ на крайната точка, в която антитялото на изследваната биологична проба се инкубира за двадесет и четири часа..
Ag-Ac комплексът се измерва с помощта на нефелометър и количеството разсеяна светлина се сравнява със същото измерване, извършено преди образуването на комплекса..
Кинетична нефелометрия
В този метод скоростта на образуване на комплекс се наблюдава непрекъснато. Скоростта на реакцията зависи от концентрацията на антигена в пробата. Тук измерванията се вземат като функция на времето, така че първото измерване се прави в момента "нула" (t = 0).
Кинетичната нефелометрия е най-използваната техника, тъй като изследването може да се извърши за 1 час, в сравнение с дългия период от време при метода на крайната точка. Съотношението на дисперсията се измерва веднага след добавянето на реагента.
Следователно, докато реагентът е постоянен, количеството присъстващ антиген се счита за право пропорционално на скоростта на промяната.
Други приложения
Нефелометрията обикновено се използва за анализ на качеството на водата, за определяне на яснотата и за контрол на процесите на нейното третиране.
Използва се също за измерване на замърсяването на въздуха, при което концентрацията на частиците се определя от дисперсията, която те произвеждат в падаща светлина..
препратки
- Britannica, Е. (s.f.). Нефелометрия и турбидиметрия. Възстановен от britannica.com
- Al-Saleh, M. (s.f.). Турбидиметрия и нефелометрия. Извлечено от pdfs.semanticscholar.org
- Bangs Laboratories, Inc. (s.f.). Възстановен от technochemical.com
- Morais, I. V. (2006). Анализ на турбидиметричен и нефелометричен поток. Извлечено от repositorio.ucp.p
- Sasson, S. (2014). Принципи на нефелометрията и турбидиметрията. Взето от notesonimmunology.files.wordpress.com
- Stanley, J. (2002). Основи на имунологията и серологията. Олбани, Ню Йорк: Thompson Learning. Получено от books.google.co.ve
- Wikipedia. (Н.О.). Нефелометрия (медицина). Изтеглено от en.wikipedia.org