Типове биохимични тестове, за какво са и за какво са важни

на биохимични тестове в микробиологията те представляват набор от химически тестове, които се провеждат върху микроорганизмите, присъстващи в проба, за да ги идентифицират; Тези микроорганизми обикновено са бактерии. На микробиолог има голям брой биохимични тестове.

Изборът на тези тестове, обаче, се основава на предварителни констатации, като например модела за оцветяване по Грам и признаците на растеж, които позволяват на бактериите да бъдат присвоени на определена категория. Биохимичните тестове се основават главно на метаболитните свойства на всеки вид бактерии. 

Не всички бактерии имат едни и същи свойства, така че се изследва дали те имат някакъв специфичен ензим чрез добавяне на субстрата и чакат реакцията да настъпи. Обикновено това определяне се дава чрез промяна на цвета или рН в културалната среда.

Често се изискват по-малко от 15 биохимични теста за надеждно идентифициране на бактерия до видовото ниво. Извършването на повече биохимични тестове може да увеличи доверието в идентификацията.

Повечето от тези биохимични тестове се провеждат в серум или кръвна плазма. Обаче, те могат да се извършват и в други биологични секрети като урина, цереброспинална течност, плеврална течност и изпражнения, наред с други..

индекс

• 1 Класификация
  • 1.1 Универсален
  • 1.2 Диференциали
  • 1.3 Специфични
• 2 Видове биохимични тестове
  • 2.1 Тест за каталаза
  • 2.2 Оксидазен тест
  • 2.3. Изпитване на солен манитолов агар (MSA)
  • 2.4 Коагулазен тест
  • 2.5 Уреазен тест
• За какво са биохимичните тестове??
• 4 Значение
• 5 Препратки

класификация

Биохимичните тестове могат да бъдат класифицирани в 3 групи:

универсален

Това са тестовете, които могат да бъдат проведени на всяка проба и които насочват микробиолога към следните биохимични тестове, които трябва да бъдат извършени, за да се получи надеждна идентификация..

пример

Тестът за каталаза и оксидаза.

диференциали

Това са тестовете, които се провеждат, за да се идентифицират микроорганизмите, присъстващи в пробата до ниво вид.

Идентификацията се прави въз основа на резултатите от комбинация от тестове, тъй като отделните резултати не са достатъчно информативни, за да се направи идентификацията.

пример

IMViC тестове и тестове за използване на захар.

специфичен

Те са специфични тестове за определен набор от видове или за подтип на даден вид. Тези тестове обикновено се правят, за да се потвърди или идентифицира нивото на подвида. Индивидуалните тестове сами по себе си са информативни.

пример

Тест за у-глутамил аминопептидаза.

Видове биохимични тестове

Тестът на каталазата

Каталазният тест е тест за демонстриране наличието на каталазен ензим чрез разлагане на водороден пероксид на кислород и вода. Малка част от бактериите се добавят към капка водороден пероксид (3%) върху слайда.

Каталазният тест е прост тест, използван от микробиолози за идентифициране на бактериални видове и за определяне способността на някои микроби да разрушат водороден пероксид чрез продуциране на каталазен ензим..

Ако се наблюдават мехурчета кислород, това означава, че бактерията притежава ензима каталаза, защото катализира разграждането на водороден пероксид в кислород и вода. Тогава се казва, че организмът е позитивен за каталазата (например: Staphylococcus aureus).

Оксидазен тест

Този тест се използва за идентифициране на микроорганизми, които съдържат ензима цитохром оксидаза (важен в електронната транспортна верига). Обикновено се използва за разграничаване на семействата Enterobacteriaceae и Pseudomadaceae.

Цитохромоксидазата прехвърля електроните от електронната транспортна верига към кислород (последния акцептор на електрони) и я свежда до вода. Оксидазните тестове осигуряват изкуствени електронни донори и акцепторни молекули.

Когато донорът на електроните се окислява чрез действието на цитохромоксидазата, средата става тъмно лилава и се счита за положителен резултат. Микроорганизмът Pseudomonas aeruginosa е пример за положителна оксидазна бактерия.

Тест за солен манитолов агар (MSA)

Този тип тест е както селективен, така и диференциален. MSA ще избере организми, способни да живеят в среда с висока концентрация на сол, като например видове стафилокок за разлика от вида на стрептокок, чийто растеж е блокиран при тези условия.

Различната компонента в този тест е захарен манитол. Организми, които могат да използват манитол като източник на храна, ще произвеждат странични продукти на ферментацията, които са кисели и следователно ще понижат рН на средата.

Киселинността на средата причинява рН индикатор, фенолово червено, да пожълтява. Примери за видове бактерии, които могат да бъдат диференцирани по този метод са: Staphylococcus aureus (положително, защото ферментира манитол) и Staphylococcus epidermidis (отрицателно, защото манитолът не ферментира).

Коагулазен тест

Коагулазата е ензим, който подпомага коагулирането на кръвната плазма. Този тест се провежда върху положителни грам-положителни и каталазо-положителни бактерии за идентифициране Staphylococcus aureus (положителна коагулаза) Всъщност коагулазата е фактор на вирулентност на този бактериален вид.

Образуването на съсиреци около инфекция, причинена от тази бактерия, вероятно я предпазва от фагоцитоза. Този тест е много полезен, когато искате да правите разлика между Staphylococcus aureus от други видове. \ t стафилокок които са отрицателна коагулаза.

Уреазен тест

Този тест се използва за идентифициране на бактерии, способни да хидролизират урея, използвайки ензима уреаза. Той обикновено се използва за разграничаване на пола Протей на други чревни бактерии.

Хидролизата на уреята произвежда амоняк като един от неговите продукти. Тази слаба основа повишава рН на средата над 8.4 и рН индикаторът (фенолово червено) се променя от жълт на розов. Пример за положителна уреазна бактерия е Proteus mirabilis.

За какво са биохимичните тестове??

Биохимичните тестове в микробиологията се използват за диагностициране на заболявания, причинени от микроби и за наблюдение на лечението, което се прилага за борба с тях. Освен това те се използват за скрининг на инфекциозни заболявания и за тяхната прогноза..

Биохимичната идентификация на микроорганизмите дава представа за това какво могат да направят тези микроорганизми, като е възможно да се прояви дискриминация на различни щамове от един и същи вид по специфични биохимични профили.

Разликите в специфичните ензимни дейности информират за екологията, физиологията или естественото местообитание на микроорганизма, което в някои случаи може да се счита за важна информация.

важност

Структурните различия по отношение на формата, размера и разположението на бактериите помагат много малко в процеса на идентификация, тъй като има много видове бактерии, които имат сходна форма, размер и разположение.

Поради тази причина в крайна сметка идентифицирането на бактериите се основава предимно на различията в техните биохимични дейности.

Всеки вид бактерии има добре дефиниран набор от метаболитни дейности, различни от всички други видове. Тези биохимични "пръстови отпечатъци" са свойства, контролирани от бактериални ензими.

По този начин, биохимичните тестове са важни, защото те помагат на изследователя да идентифицира правилно патогените, присъстващи в пробата, и по този начин да могат да препоръчат подходящото лечение на пациента..

препратки

1. Бекет, Г., Уокър, С. и Рае, П. (2010). Клинична биохимия (8-мо изд.). Wiley-Blackwell.
2. Clarke, P.H., & Cowan, S.T. (1952). Биохимични методи за бактериология. Вестник на общата микробиология, 6(1952), 187-197.
3. Gaw, A., Murphy, М., Srivastava, R., Cowan, R., St, D. & O'Reilly, J. (2013). Клинична биохимия (5-то изд.). Elsevier Health Sciences.
4. Goldman, E. & Green, L. (2008). Практически наръчник по микробиология (2-ро изд.). CRC Press.
5. Harrigan, W. (1998). Лабораторни методи в хранителната микробиология (3-то изд.). Академик Прес.
6. Vasanthakumari, R. (2009). Практическа микробиология. BI публикации Pvt Ltd.