Какво е просто оцветяване? Топ функции



на просто оцветяване е бърза и проста процедура на оцветяване, при която се използва единична боя, затова се нарича проста. Той се използва главно за определяне на морфологията и организацията на клетките, присъстващи в проба.

Естествено, клетките нямат цвят, така че е необходимо да ги направите видими по някакъв начин, когато се наблюдават в микроскопа.

Важно е да се подчертае, че оцветителите, които се използват в обикновеното оцветяване, трябва да бъдат основни с положителен заряд (катионен), така че те да могат спонтанно да се свързват с клетъчната стена и цитоплазмата.

Тези клетъчни структури са заредени отрицателно. Ето защо багрилото, положително заредено, се привлича към клетките и се свързва спонтанно с тях. По този начин всички присъстващи клетки в пробата се оцветяват бързо.

Оцветители, използвани в обикновеното оцветяване

Има няколко основни багрила, които могат да се използват в микробиологичната лаборатория. Най-използваните са:

- Метиленово синьо.

- Кристално виолетово.

- Малахитно зелено.

- Основен фуксин.

Всички тези багрила работят добре в бактериите, защото имат положително заредени (катионни) оцветени йони (хромофори).

Времето на оцветяване за повечето от тези багрила е относително кратко. Те обикновено варират от 30 секунди до 2 минути, в зависимост от афинитета на багрилото.

Важно е да се има предвид, че преди боядисване на пробата чрез просто оцветяване, тя трябва да бъде удължена и фиксирана към предметното стъкло (слайд); Разширената и фиксирана проба се нарича намазка.

6 стъпки за извършване на просто оцветяване

Стъпка 1

Поставете плъзгача върху оцветител и поставете желаното багрило. Оставете съответното време.

Обикновено обикновеното оцветяване отнема няколко секунди или няколко минути, в зависимост от използваното оцветяване.

наблюдение

В тази стъпка е важно да не се превишава препоръчаното време за използваното багрило, тъй като кристалите могат да се образуват върху листа, произвеждайки така наречените "артефакти", които нарушават морфологията на клетките..

Стъпка 2

Внимателно измийте намазката на слайда с дестилирана вода от бутилка или също така с чешмяна вода, която тече бавно, докато оттокът стане прозрачен. Това обикновено отнема от 5 до 10 секунди.

наблюдение

Не полагайте водния поток директно върху размазването, за да предотвратите повредата на пробата.

Ако нямате дестилирана вода, можете да използвате чешмяна вода без никакви проблеми, тъй като това няма да повлияе на резултатите от оцветяването.

Стъпка 3

Изсушете плъзгача с абсорбиращи хартиени кърпи в една посока и без триене. Уверете се, че дъното на плъзгача е чисто.

Стъпка 4

Наблюдавайте оцветената намазка в микроскопа. Започнете с най-отдалечените цели, за да намерите мястото, което искате да наблюдавате по-подробно. Променете целта си да се доближите по-близо до извадката.

наблюдение

За използване на обектива с най-голямо увеличение (нормално 100Х) трябва да се използва потапящо масло, тъй като то помага на светлината да проникне по-добре и изображението да бъде по-рязко. Не е необходимо да се използва покривно стъкло.

Стъпка 5

И накрая, изхвърлете всички проби в подходящ контейнер, който е надлежно етикетиран като "биологичен".

препратки

  1. (2001). Микробиологични приложения: Лабораторно ръководство по обща микробиология (8 тата изд.). Фирмите на McGraw-Hill.
  2. Harisha, S. (2006). Въведение в практическата биотехнология (1во). Средства за защитна стена.
  3. Moyes, R. B., Reynolds, J., & Breakwell, D.P. (2009). Предварително оцветяване на бактериите: Обикновено оцветяване. Актуални протоколи в микробиологията, (SUPPL 15), 1-5.
  4. Pommerville, J. (2013). Лабораторни основи на микробиологията на Алкамо (10тата). Jones & Bartlett Learning.
  5. Prescott, H. (2002). Лабораторни упражнения по микробиология (5 тата). Фирмите на McGraw-Hill.
  6. Sumbali, G. & Mehrotra, R. (2009). Принципи на микробиологията (1во). Образование Tata McGraw-Hill.