Дял:
Процедура на йонообменна хроматография, принципи
на йонообменна хроматография е аналитична техника, която се основава на принципите на хроматографията за отделяне на йонни и молекулярни видове, които проявяват полярност. Това се основава на предпоставката за сходството на тези вещества с други, наречени йонообменници.
В този смисъл веществата, които имат електрически заряд, са сегрегирани благодарение на йонното изместване, при което един или повече йонни видове се прехвърлят от флуид към твърдо вещество чрез обмен, поради наличието на еднакви заряди..
Тези йонни видове са свързани с функционални групи, разположени на повърхността чрез взаимодействия от електростатичен тип, които улесняват йонния обмен. Освен това ефективността на отделянето на йони зависи от бързината на обмена на веществата и баланса между двете фази; това се основава на това прехвърляне.
индекс
- 1 Процедура
- 1.1 Предишни съображения
- 1.2 Процедура
- 2 Принципи
- 3 Приложения
- 4 Препратки
процес
Преди започване на процеса на йонообменна хроматография трябва да се вземат предвид някои важни фактори, които позволяват да се оптимизира сепарацията и да се получат по-добри резултати.
Сред тези елементи са количеството на аналита, моларната маса или молекулното тегло на пробата и натоварването на видовете, които съставляват аналита..
Тези фактори са необходими за определяне на параметрите на хроматографията, като стационарната фаза, размера на колоната и размерите на порите на матрицата, наред с други.
Предишни съображения
Има два вида йонообменна хроматография: тази, която включва катионно изместване и тази, която включва анионно изместване..
В първата, подвижната фаза (която съставлява отделяната проба) притежава йони с положителен заряд, докато стационарната фаза притежава йони с отрицателен заряд..
В този случай, видовете с положителен заряд се привличат от стационарната фаза в зависимост от тяхната йонна сила и това се отразява в времето на задържане, показано на хроматограмата..
По подобен начин, при хроматография, включваща анионно изместване, подвижната фаза има отрицателно заредени йони, докато стационарната фаза има положително заредени йони..
С други думи, когато стационарната фаза има положителен заряд, тя се използва при отделянето на анионните видове и когато тази фаза е анионна, тя се използва при сегрегацията на катионните видове, присъстващи в пробата..
В случая на съединения, които представляват електрически заряд и проявяват разтворимост във вода (такива като аминокиселини, малки нуклеотиди, пептиди и големи протеини), те се комбинират с фрагменти, които имат противоположен заряд, произвеждайки връзки с йонна природа с фазата. неподвижно, което не е разтворимо.
процес
Когато стационарната фаза е в равновесие, има функционална група, която е податлива на йонизация, в която веществата, представляващи интерес от пробата, са сегрегирани и количествено определени и могат да бъдат комбинирани, докато се движат по колоната. хроматографско.
Впоследствие, видовете, които са били комбинирани, могат да бъдат елуирани и след това събрани с използване на елуент. Това вещество се състои от катионни и анионни елементи, които водят до по-голяма концентрация на йони по колоната или модифициране на рН характеристиките на същите..
В обобщение, първият вид, способен да обменя йони, е положително зареден с противойони, и след това се получава комбинацията от йони, които ще се секретират. Когато процесът на елуиране започне, слабо свързаните йонни видове страдат от десорбция.
След това йонните видове с по-силни връзки също стават десорбирани. Накрая се осъществява регенерация, при която е възможно първоначалното състояние да се възстанови чрез промиване на колоната с буфериран вид, който се намесва първоначално..
начало
Йоннообменната хроматография се основава на факта, че видовете, които проявяват електрически заряд, присъстващ в аналита, са разделени благодарение на силите на привличане на електростатичен тип, когато те се движат през смолиста субстанция с йонно тип Специфични условия на температура и рН.
Тази сегрегация се дължи на обратимия обмен на йонни видове между откритите в разтвора йони и тези, намиращи се в смолистото заместващо вещество, което има йонна природа..
По този начин, процесът, използван за разделяне на съединенията в пробата, е подчинен на вида на използваната смола, следвайки принципа на анионните и катионните обменници, описани по-горе..
Тъй като интересуващите се йони са затворени в смолиста субстанция, възможно е хроматографската колона да тече, докато останалата част от йонните видове бъде елуирана..
Впоследствие йонните видове, които са затворени в смолата, се оставят да текат, докато се движат през подвижна фаза с по-голяма реактивност по колоната..
приложения
Тъй като при този вид хроматография се извършва разделяне на веществата поради йонообмен, то има голям брой приложения и приложения, сред които са следните:
- Разделяне и пречистване на проби, съдържащи комбинации от органични съединения, състоящи се от вещества като нуклеотиди, въглехидрати и протеини \ t.
- Контрол на качеството при обработката на водата и в процесите на дейонизация и омекотяване на разтвори (използвани в текстилната промишленост), както и сегрегацията на магнезий и калций.
- Разделяне и пречистване на лекарства, ензими, метаболити, присъстващи в кръвта и урината, и други вещества с алкално или киселинно поведение във фармацевтичната промишленост.
- Деминерализация на разтвори и вещества, където е желателно да се получат съединения с висока чистота.
- Изолиране на специфично съединение в проба, която искате да се раздели, за да се получи подготвително разделяне на същото, за да се подложи на последващ анализ.
Аналогично, този аналитичен метод се използва широко в нефтохимическата, хидрометалургичната, фармацевтичната, текстилната, хранително-вкусовата и полупроводниковата промишленост, наред с други области.
препратки
- Wikipedia. (Н.О.). Йонна хроматография. Изтеглено от en.wikipedia.org
- Biochem Den. (Н.О.). Какво е йонна обменна хроматография и нейните приложения. Изтеглено от biochemden.com
- Прочетете Прочетете. (Н.О.). Йонно-обменна хроматография | Принцип, метод и приложения. Взето от studyread.com
- Въведение в практическата биохимия. (Н.О.). Йонно-обменна хроматография. Извлечено от elte.prompt.hu
- Helfferich, F. G. (1995). Йонна борса. Получено от books.google.co.ve