Хроматограма за това, което е и видове

на хроматограма е двуизмерен графичен запис, получен в абсорбираща среда, която показва отделянето на вещества чрез хроматография. На хроматограмата се образува видим модел, пикове или петна, отразяващи физическото разделяне на компонентите на дадена смес.

Долната фигура е хроматограма с три пика, А, В и С на три компонента от пробата, разделени чрез хроматография. Наблюдава се, че всеки от трите пика има различна височина и местоположение в времевата ос на хроматограмата.

Оста на ординатата или Y записва информация за силата на сигнала (в миливолта mV в този случай). Представлява регистъра, в зависимост от детектора, на някои физични свойства на веществото или отделния компонент на сместа.

Височината на пика е пропорционална на концентрацията на отделения компонент на пробата в оптимална система. Така например, лесно е да се види, че компонент В е в по-голяма пропорция от А и С.

На абсцисата или по оста X е представено времето на задържане на компонентите на пробата или сместа. Това е времето, което изтича от инжектирането на пробата, докато спре, като е различно за всяко чисто вещество.

индекс

• 1 За какво е хроматограма??
  • 1.1 Идентифициране на вещества
  • 1.2 Класификация на чистотата на веществата
  • 1.3 Количествено определяне на веществата
• 2 вида
  • 2.1 Хроматограми на хартия или тънък филм
  • 2.2 Хроматограми, генерирани от детектори
• 3 Препратки

За какво е хроматограма??

Той представлява окончателният запис на целия хроматографски процес. От него се получават параметри, които са от аналитичен интерес. Това може да бъде получено като електронен файл, печатна хистограма или в подкрепа на процеса; например на хартия.

Оста Y се генерира от сигнални детектори или интензитет на реакцията, като например спектрофотометри. Необходим е оптимален анализ на времето на характеристиките на получените пикове или петна; размер, местоположение, цвят, наред с други аспекти.

Анализите на хроматограми обикновено изискват използването на контроли или стандарти, вещества с идентичност и известна концентрация. Анализът на тези контроли позволява да се установи чрез сравняване с пробите, характерни за компонентите на изследваната проба.

В хроматограмата можете да наблюдавате и анализирате как се извършва отделянето на компонентите на сместа. Неговото оптимално изследване позволява да се идентифицира вещество, да се докаже неговата чистота, да се определи количеството на веществата, присъстващи в смес, наред с други аспекти.

Извлечената информация може да бъде от качествено естество; например, когато се идентифицират вещества и се определя тяхната чистота. Количествената информация е свързана с определянето на броя на компонентите на сместа и концентрацията на отделения аналит.

Идентифициране на вещества

Чрез анализиране на резултатите от хроматограмата могат да бъдат идентифицирани различни вещества чрез сравняване на времената на задържане с времето на известните вещества. Може да се наблюдава, ако изследваните вещества пътуват на същото разстояние, ако имат същото време като познатите вещества.

Например, хроматограмата дава възможност да се открият и идентифицират в урината на спортистите лекарствени метаболити, като стимуланти и стероиди. Това е важна подкрепа при проучването и изследването на някои метаболити, произведени от генетични нарушения при новороденото.

Хроматограмата улеснява откриването на халогенирани въглеводороди, присъстващи в питейната вода, наред с други вещества. Той е незаменим в лабораторния анализ на контрола на качеството, тъй като позволява да се открият и идентифицират замърсителите, присъстващи в различните продукти..

Класификация на чистотата на веществата

В хроматограма можете да различавате чисти и нечисти вещества. Чиста субстанция би произвела единичен пик в хроматограмата; докато нечиста субстанция ще произведе два или повече пика.

Чрез адекватно коригиране на условията, при които се извършва хроматография, могат да бъдат предотвратени образуването на един пик от две вещества.

Количествено определяне на веществата

Чрез анализиране на площта на пиковете на хроматограмата може да се изчисли концентрацията на компонентите на пробата.

Следователно, площта на пика е пропорционална на количеството на веществото, присъстващо в пробата. Тези количествени данни се получават в силно чувствителни системи, като например такива, които генерират газ или течни хроматографии.

тип

Една от класификациите на хроматограмите е тясно свързана с различните видове хроматография, които генерират съответната хроматограма.

В зависимост от условията на изпълнение на детекторите, наред с други аспекти, хроматограмата ще варира по съдържание и качество.

Хроматограми на хартия или тънък филм

Хроматограмата може да се генерира директно върху хартия или тънък филм, като директно показва разпределението или разпределението на компонентите на пробата.

Той е много полезен за отделяне и изследване на оцветени вещества, които имат естествени пигменти, като хлорофил. Тя може да бъде подложена на процеси на развитие, в случай че веществата нямат естествен цвят и е полезна за качествени изследвания.

Хроматограми, генерирани от детектори

Хроматограмата може също да бъде получена чрез използване на детектор, който записва отговора, изхода или крайния сигнал на хроматографията. Както беше споменато по-горе, този детектор обикновено е спектрофотометър, масспектрометър, автоматични секвентори, електрохимикали, между другото..

Хроматограмите, генерирани в колони, независимо дали от газове, или от течности, както и такива с висока разделителна способност в тънък слой, използват детектори.

В зависимост от типа на детектора, хроматограмата може да се класифицира като диференциална или интегрална, в зависимост от формата на реакция на детектора..

Диференциална хроматограма

Един диференциален детектор непрекъснато измерва сигнала за отговор на хроматограмата, докато интегралните детектори измерват кумулативно съответния сигнал.

Различната хроматограма е хроматограма, получена чрез диференциален детектор. Сред тези детектори могат да се споменат, например, спектрофотометри и детектори за промени в електрическата проводимост.

Този тип хроматограма е показал резултата от отделянето на аниони от проба, открити чрез индиректна фотометрия. Същите резултати са получени и за изследване на йони, например, с окончателно откриване чрез кондуктометрия.

Горната графика показва примера на диференциалната хроматограма, получена от автоматични ДНК секвенсери (дезоксирибонуклеинова киселина). Графиката ясно показва върховете на четири цвята, един цвят за всяка от ДНК азотните основи.

Чрез подкрепата на компютъризирана програма се улеснява тълкуването на последователността на анализираните ДНК бази, както и за по-сложните анализи..

Пълна хроматограма

Интегрираната хроматограма съответства на тази, получена от интегрален детектор. На тази хроматограма се доказва продукцията на единичен изследван компонент. Не се получават пикове, както в диференциала.

В интегралната хроматограма се получава запис с форма, описана като стъпка. Този формуляр е частта от хроматограмата, която съответства на количеството на едно вещество, което напуска колоната.

препратки

1. Bhanot, D. (2013). Как да чета на хроматограма? Възстановен от: lab-training.com
2. Кери, Ф. А. (2006). Органична химия Шесто издание. Mc Graw Hill
3. Хроматография днес. (2014). Какво представлява хроматограмата? Изтеглено от: chromattoday.com
4. Mathias, J. (2018). Ръководство за начинаещи: Как да интерпретираме хроматография с газ хроматография Резултати за масова спектрометрия. Взето от: innovatechlabs.com
5. Испанско дружество по хроматография и свързани техники. (2014). Хроматограмата. Възстановен от: secyta.es
6. Wikipedia. (2019). Хроматография на хартия. Изтеглено от: wikipedia.org