Основа на Cetrimida агар, препарат, употреба

на цетримид агар или цетримид е селективна твърда хранителна среда, предназначена за изолиране на Pseudomonas aeruginosa. Тя се основава на подчертаването на производството на пигменти, характерни за този вид, и е разработено от модификацията на Tech agar, създадена от King, Ward и Raney.

Първоначалната формула съдържа соли на магнезиев хлорид, калиев сулфат, разграждане на панкреатичен желатин и агар-агар. Модификацията на формулата се състои в добавянето на цетримид (цетил триметил амониев бромид) и глицерол..

Цетримид агар е полезен за микробиологично изследване на проби, в които присъства Pseudomonas aeruginosa. Трябва да се отбележи, че тази бактерия е от голямо значение, защото въпреки че е част от нормалната микробиота на околната среда, тя често се държи като опортюнистичен патоген..

Ето защо, един от най-честите проблеми, причинени от този зародиш, са вътреболнични инфекции, т.е. тези, които се появяват в болничната среда, атакувайки пациенти, които имат депресирана имунна система..

От друга страна, поради афинитета, който този микроорганизъм има с влажността, най-уязвимите цели на замърсяване са: асистирано оборудване за дишане, лекарства, пулверизатори, водни източници, климатици, дезинфектанти, сапуни, инжекционни разтвори, отворени рани катетри, уринарни катетри и др.

В този смисъл цетримидният агар е полезен за извършване на микробиологични контроли и култури към посочените по-рано елементи.

индекс

• 1 Фондация
  • 1.1 Тълкуване
• 2 Подготовка
• 3 Използване
• 4 Размножена
• 5 Ограничения
• 6 Контрол на качеството
• 7 Препратки

фундамент

Цетримид агар се основава на способността на средата да стимулира растежа на P. aeruginosa, стимулират производството на техните пигменти и от своя страна възпрепятстват растежа на други микроорганизми.

Тези свойства се дължат на функцията, която всеки от неговите компоненти изпълнява. Наличният желатинов пептон служи като източник на азот, витамини и минерали. Глицерол или глицерин действа като въглероден източник.

От своя страна, cetrimide (цетил триметил амониев бромид) е вещество, което инхибира растежа на други бактерии, отколкото P. aeruginosa, включително други видове, принадлежащи към същия род.

Инхибирането настъпва, тъй като цетрамид действа като катионен детергент, дестабилизиращ плазмената мембрана на повечето бактерии, с изключение на P. aeruginosa и някои други, които успяват да оцелеят.

От друга страна, съдържа магнезиев хлорид и калиев сулфат. Тези съединения стимулират фенотипното изразяване, свързано с капацитета на Pseudomonas aeruginosa за получаване на различни пигменти, между които: пиоцианин, пиовердин, пиорубин, пиомеланин и флуоресцеин. Накрая, той съдържа агар-агар, който му придава твърда консистенция.

интерпретация

Интерпретацията на растежа, получена в този агар, се прави по следния начин:

Наблюдението на кръгли, гладки колонии с правилни ръбове, произвеждащи синьо-зелени, зелени, кафяви или червеникави пигменти, плюс емисиите на плодов аромат (аминоацетофенон), е предполагаем резултат от наличието на тази бактерия в споменатата проба..

От друга страна, това е показателно P. aeruginosa наблюдение на ярко жълто-зелен пигмент върху колониите, когато плочата е изложена на ултравиолетова светлина.

Трябва да се отбележи, че всеки наблюдаван цвят се дължи на производството на специфичен пигмент. Синьо-зеленият пигмент съответства на производството на пиоцианин, зелено към пиовердин, червеникаво до пирурибиново, кафяво до пиомеланин и ярко жълто-зелена флуоресценция под ултравиолетова светлина до флуоресцеин.

подготовка

Претеглят се 43 g от дехидратираната среда и се разтварят в дестилирана вода. Добавят се 10 ml глицерол. Преместете сместа в топлинен източник. Оставете да ври за няколко минути до пълно разтваряне.

Автоклавирайте при 121 ° C за 15 минути. Оставете да престои и да служи в стерилни Петри ястия, когато температурата е около 50 ° C.

Оставя се да се втвърди, обърни, поръча в плакери и да се съхранява в хладилник до употреба. За да се засадят плочки с цетримид агар, те трябва да се извадят предварително от хладилника и да се оставят да станат при стайна температура..

Крайното рН на средата трябва да бъде 7.2 ± 0.2.

Цветът на дехидратираната среда е бежов, а препаратът е непрозрачен бял.

приложения

Цетримид агар може да се използва за засаждане на всички видове проби, в които се намира Pseudomonas aeruginosa. Следователно тя е полезна във всички области на микробиологията (екологични, промишлени, клинични, водни и хранителни)..

От голямо значение е да се анализират болничните среди и по този начин да се приложат корективни медиации, тъй като този микроорганизъм достига до пациентите чрез оборудване, лекарства, разтвори и замърсени консумативи, които се използват от пациента..

По този начин микроорганизмът може да инфектира долните дихателни пътища, пикочните пътища и раните на имуносупресираните пациенти.

Броят на колониите също може да се направи P. aeruginosa в микробни гранични тестове.

засадени

Цетримид агар може да се използва като първична култура. Пластината се инокулира в един от нейните ръбове и от там се разпределя чрез изчерпване на останалата част от плочата. Течните проби могат да бъдат засяти на повърхността с дигалска шпатула.

Плаките се инкубират в аеробиоза при 37 ° С за 24 часа инкубация.

ограничения

-Малък процент от щамовете на  Pseudomonas aeruginosa не произвеждат пиоцианин, така че можете да интерпретирате фалшив отрицателен.

-Някои видове Pseudomonas с клинично значение се инхибират в тази среда.

-Въпреки спазването на описаните характеристики Pseudomonas aeruginosa, те трябва да бъдат потвърдени с допълнителни идентификационни тестове. Тест, който не трябва да липсва, е тестът за оксидаза, който трябва да бъде положителен.

-Някои ентеробактерии могат да растат в тази среда и да развият жълт пигмент, но той се различава от Pseudomonas aeruginosa при което при подлагане на плаката на ултравиолетова светлина няма флуоресценция.

-Serratia marcescens успява да разработи и произведе розов пигмент.

-Ако плаките, засети с цетримиден агар, се експонират за известно време при стайна температура, щамовете на P. aeruginosa те могат да загубят флуоресценцията, наблюдавана при ултравиолетова светлина, въпреки че свойствата се възстановява, ако се инкубира отново при 37 ° С.

Контрол на качеството

За да се тества правилното функциониране на цетримид агар, могат да се използват контролни щамове, като: Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Stenotrophomonas maltophilia ATCC 13637, Escherichia coli ATCC 25922 и Staphylococcus aureus ATCC 25923.

Очакваните резултати са:

• за P. aeruginosa добър растеж, със синьозелен пигмент и положителен флуоресцеин.
• S. maltophilia и S. aureus ще бъде частично или напълно потиснато.
• Очаква се това Escherichia coli да бъде напълно потиснат.

препратки

1. Callicó A, Cedré B, Sifontes S, Torres V, Пино Y, Callís A, Esnard S. Фенотипна и серологична характеристика на клинични изолати от Pseudomonas aeruginosa. VacciMonitor. 2004; 13 (3): 1-9.
2. Лаборатории Конда Пронадиса. Цетримидна агарова основа. 2014. Налично на: condalab.com
3. Laboratories Britania. Cetrimida агар. 2015. Налично на: britanialab.com
4. BD Laboratories BD Pseudosel агар (Cetrimide агар). 2013. Налично на: bd.com
5. Лаборатория Франсиско Сория Мелгизо, С.А. Цетримид агар. 2009. Налично на: http://f-soria.es