Основа, подготовка и употреба на MacConkey Agar

на Макконки агар Това е твърда хранителна среда, която позволява изключително изолиране на Грам отрицателни бацили. Поради тази причина той е селективна среда и също така позволява да се разграничат ферментационните и неферментиращите бацили от лактоза, което го прави диференциална среда. Той е една от най-широко използваните хранителни среди в микробиологична лаборатория.

Тази среда се използва главно за изолиране на грам отрицателни бацили, принадлежащи на семейството Enterobacteriaceae, включително опортюнистични и ентеропатогенни видове.

Може да се използва и за изолиране на други ентерични бактерии, които обитават стомашно-чревния тракт, но не принадлежат Enterobacteriaceae, като Aeromonas sp, Plesiomonas sp, между другото.

И накрая, той може да изолира други грам-отрицателни, неферментиращи глюкозни бацили, които се намират в околната среда, водата или почвата, но понякога могат да бъдат опортюнистични патогени като Pseudomonas sp, Acinetobacter sp, Алкална sp, Chromobacterium violaceum, Stenotrophomonas maltophilia, между другото.

индекс

• 1 Фондация
  • 1.1 Макконки агар
• 2 Подготовка
• 3 Използване на конвенционален агар MacConkey
• 4 Други варианти на MacConkey агар
  • 4.1 Макконки агар с сорбитол
  • 4.2 Макконки агар без кристално виолетово или сол
  • 4.3 Макконки агар с цефоперазон
  • 4.4 Макконки агар, приготвен с 10% морска вода v / v
• 5 Препратки

фундамент

Агар от MacConkey

Основата на тази среда може да бъде обяснена чрез описанието на нейните компоненти, тъй като всяка от тях има цел, която определя неговото свойство.

Жлъчни соли и виолетов кристал

В този смисъл, агарът MacConkey има сложен състав. На първо място тя съдържа жлъчни соли и виолетов кристал.

Тези елементи са отговорни за инхибиране на растежа на грам-положителните бактерии и някои изискващи грам-отрицателни бацили. На свой ред това благоприятства развитието на Грам отрицателни бацили, които не са засегнати от тези вещества. Затова е селективна среда.

Смята се, че е леко селективен в сравнение с други медии, които също инхибират растежа на грам-положителните бактерии, а също и на повечето грам-отрицателни бактерии..

Той е изключително селективен за специфичен род, като TCBS агар за изолиране на Vibrio cholerae и други подобни халофилни и алкалофилни видове.

Пептони, полипектони и лактоза

Съдържа вещества, които осигуряват необходимите хранителни вещества за микроорганизмите, които се развиват в тази среда, като пептони, полипектони и лактоза.

Лактозата е ключова точка за средата като диференциална среда, тъй като микроорганизмите, които имат способността да ферментират лактозата, ще развият силни розови колонии..

Някои бактерии могат да ферментират лактозата бавно или слабо, като развиват бледо розови колонии и остават положителна лактоза.

Тези, които не ферментират лактозата, използват пептони като енергиен източник, произвеждащ амоняк, алкализиращ средата. Следователно колониите, които са с произход, са безцветни или прозрачни.

PH индикатор

Промяната на цвета се постига чрез друго съществено съединение, което има MacConkey агар. Това съединение е индикатор за рН, който в този случай е неутрален червен.

Ферментацията на лактоза генерира производството на смесени киселини. Те подкисляват средата при рН под 6.8..

Това кара рН индикатора да се обърне към интензивен розов оттенък. Интензивността на цвета може да варира в зависимост от крайното рН.

Дестилирана вода, натриев хлорид и агар

От друга страна, той съдържа дестилирана вода и натриев хлорид, които дават хидратация и осмотично равновесие на средата. Накрая, средата съдържа агар, който е основата, която осигурява консистенция на твърда среда.

Приготвената агарова среда на MacConkey трябва да има крайно рН, коригирано до 7.1 ± 0.2..

подготовка

За един литър агар от MacConkey, 50 g от дехидратираната среда трябва да се претеглят, след това се поставят в фиола и се разтварят в един литър дестилирана вода. След 10 минути почивка се нагрява чрез постоянно смесване, докато кипи 1 минута.

След това се поставя фиола в автоклава и се стерилизира при 121 ° С в продължение на 20 минути. В края на времето, той се отстранява от автоклава и се оставя да се охлади до температура от 45 ° С, след това се сервира в стерилни петриеви блюда вътре в капака на ламинарен поток или пред горелката на Bunsen..

Оставя се да се втвърди и да се съхранява в тапата, обърната и да се съхранява в хладилник при 2-8 ° C до употреба.

За да се получи агар MacConkey, който инхибира ефекта на бучене, получен от рода Proteus, се използва MacConkey агар с ниско съдържание на сол..

Използване на конвенционален агар MacConkey

MacConkey агар е включен във всички групи културални среди, подредени за сеитба на клинични проби, получени в лабораторията. Той е полезен и в микробиологията на храните и микробиологията на околната среда.

Разнообразието от грам отрицателни бацили, които растат в тази среда, изразяват фенотипни характеристики, които помагат за предполагаема диагноза на въпросния вид. Например, размерът, цветът, консистенцията и миризмата на колониите са някои от характеристиките, които могат да направляват.

В тази среда, видове от Escherichia coli, Klebsiella sp и Enterobacter sp произвеждат силни розови колонии, заобиколени от област от утаена жлъчка.

В толкова бактерии като Citrobacter sp, Providencia sp, Serratia sp и Hafnia sp те могат да се появят без цвят след 24 часа или бледо розово за 24-48 часа.

По същия начин родовете Proteus, Edwadsiella, Salmonella и Shigella произвеждат безцветни или прозрачни колонии..

Други варианти на агар MacConkey

Има и други варианти на агар MacConkey, които имат специфични цели. След това те се споменават:

MacConkey агар със сорбитол

Тази среда е предназначена за разграничаване на ентеропатогенния щам (Escherichia coli ентерохеморагичен O157: Н7) на останалите щамове на Escherichia coli.

Тази среда променя въглехидратната лактоза за сорбитол. Щамовете на Е. coli ентерогеморагичен O157: Н7 се различават от останалите, тъй като не ферментират сорбитол и следователно се получават прозрачни колонии, но останалите щамове Е. coli ако ферментират сорбитол и колониите са силно розови.

MacConkey Agar без кристално виолетово или сол

Този агар се различава много от класическия агар MacConkey, тъй като той няма кристално виолетово, грам-положителните бактерии могат да растат.

От друга страна, липсата на сол инхибира появата на рояване върху агара, произведен от някои ентерални бацили, като тези от рода Протей, и по този начин улеснява изолирането на всички присъстващи бактерии, включително Грам-положителни бактерии.

MacConkey агар с цефоперазон

Този вариант на MacConkey агар е предназначен първоначално да се изолира Laribacter hongkongensis а по-късно разбраха, че това е полезно за изолацията Arcobacter butzleri. АИ двете са леко извити отрицателни Грам бацили, резистентни към цефоперазон.

Тези бактерии наскоро са свързани като причини за гастроентерит и диария, придобити в азиатски и европейски индивиди, като се появяват два мощни възникващи патогена..

Антибиотикът позволява да се инхибира съпътстващата флора на стомашно-чревния тракт, което благоприятства развитието на тези бактерии, като ги предпазва да не останат незабелязани, тъй като те изискват 72 часа да растат.

MacConkey агар, приготвен с 10% морска вода v / v

Този вариант е полезен за оценка на бактериалните здравни показатели за фекално замърсяване, включително общи колиформни и фекални колиформни форми в релаксиращи солени води (плажове и заливи)..

Cortez et al, 2013 показват, че получената по този начин среда значително увеличава възстановяването на тези микроорганизми в солена среда, в сравнение с използването на MacConkey агар, приготвен с дестилирана вода..

Това е така, защото модифицираната среда стимулира растежа на бактерии, които са физиологично в състояние на покой "жизнеспособни, но не култивируеми", поради което не се възстановяват в конвенционални среди..

препратки

1. Lau SK, Woo PC, Hui WT, et al. Използване на цефаперазон MacConkey агар за селективна изолация на Laribacter hongkongensis. J Clin Microbiol. 2003; 41 (10): 4839-41.
2. - Маккони агар. Уикипедия, Свободната енциклопедия. 4 април 2018, 18:16 UTC. 29 Дек 2018, 15:22 en.wikipedia.org
3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld А. (2009). Микробиологична диагноза на Bailey & Scott. 12 изд. Аржентина. Panamericana S.A Редакция.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Микробиологична диагноза. (5-то изд.). Аржентина, редакция Panamericana S.A..
5. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Влияние на културална среда, приготвена с морска вода, върху здравните показатели в морските води на минерални извори в Чичириви, Фалкон, Венецуела. Rev Soc Come Microbiol 2013; 33: 122-128
6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Практическа клинична микробиология. Университет на Кадис, 2-ро издание. Служба за публикации на UCA.