Хранителна основа на агар, подготовка и употреба

на хранителен агар това е неселективна и недиференциална твърда хранителна среда. В тази среда растат всички видове бактерии, които не изискват от хранителна гледна точка.

Той е прост начин и въпреки името си съдържа по-ниска хранителна стойност в сравнение с други подобни среди, като агар с инфузия на мозъчна сърце или соев агар триптиказа..

Неговата полезност в лабораторията е много разнообразна. Използва се предимно за субкултура на видове, поддържане на щамове, преброяване на колонии, като основа за приготвяне на кръвен агар.

По същия начин, благодарение на своя светлобежов цвят, производството на пигменти, генерирани от някои бактериални щамове, като зеленикавия пигмент на Pseudomonas aeruginosa, тухлият червен пигмент, произведен от Serratia marcescens при стайна температура, златистожълтия пигмент на Staphylococcus aureus, между другото.

В допълнение, той е един от най-икономичните медии за отглеждане на пазара.

индекс

• 1 Фондация
• 2 Състав
• 3 Подготовка
• 4 Използване
  • 4.1 Като основа за приготвяне на кръвен агар
  • 4.2 Стимулиране на спорообразуването на спорообразуващи бактерии
  • 4.3 Поддръжка на напрежението
  • 4.4 Преброяване на колониите
  • 4.5 Извършване на диагностични тестове
  • 4.6 Възстановяване на мезофилни аеробни релаксиращи солени води (плажове)
• 5 Препратки

фундамент

Както вече споменахме, това е много просто средство, което се основава на осигуряване на хранителни вещества за бактериален растеж без ограничение и без сложни реакции за интерпретиране..

Тъй като средата е полупрозрачна, тя е идеална за преброяване на колониите по метода на засяване по дълбочина.

композиция

Състои се главно от екстракт от месо или екстракт от дрожди, пептони или преливане на панкреатичен желатин, агар-агар, натриев хлорид и дестилирана вода..

екстракт от месо или пептон дрожди и представлява източниците на въглерод и основните минерали (азот, фосфор и сяра), които да бъдат използвани от бактериите за енергия и растежни фактори.

По същия начин, агар-агар е основата на всички твърди растежни среди, заместващи желатин, който е първото основно съединение, използвано от Robert Koch, за да даде на неговата среда твърда консистенция..

Агарът е полизахарид, съставен от галактоза, галактоманнан, агароза и агаропектин. Задава се при 40 ° C и се топи близо до 100 ° C.

От своя страна, натриевият хлорид осигурява средата с осмоларитет, необходим за бактериалното развитие.

Накрая, водата служи за хидратиране и разтваряне на лиофилизираните съединения. Трябва да се използва дестилирана вода, регулирана до неутрално рН. Водата от чешмата не трябва да се използва, защото съдържа калций и магнезий, които могат да реагират с фосфатите в средата и да образуват неразтворими соли..

подготовка

За един литър хранителен агар трябва да се претеглят 31 g от дехидратираната среда. Той се поставя в фиола и се разтваря в литър дестилирана вода. След 5 минути почивка, нагрявайте през източник на топлина и разбърквайте постоянно, докато кипи 1 или 2 минути.

След това се поставя фиола в автоклав и се стерилизира при 121 ° С в продължение на 20 минути.

В края на времето, той се отстранява от автоклава и се сервира в стерилни петриеви блюда, като се използва ламинарен абсорбатор или горелка Bunsen..

Ако петриевите панички са за еднократна употреба (пластмаса), средата трябва да се разпредели, когато агарът е с температура приблизително 50 ° C, за да не се деформират от прекомерна топлина..

Оставя се да се втвърди и да се съхранява в тапата, обърната и да се съхранява в хладилник при 2-8 ° C до употреба.

Плочите трябва да бъдат закалени, преди да бъдат засяти. Не трябва да се използват подхранващи плочи от агар, ако са замърсени или дехидратирани.

РН на подготвената среда трябва да се регулира до 7.3 ± 0.2.

приложения

Това е най-простата хранителна среда, използвана в микробиологичната лаборатория. Неговата формула е отлична за растежа на не-изискващи бактерии.

Неговите основни употреби са обяснени по-долу:

Като основа за приготвяне на кръвен агар

Тази среда понякога се използва като основа за приготвяне на кръвен агар, но тя не е най-често използваната база.

Стимулиране на спорообразуването на спорообразуващи бактерии

Тази културална среда е особено полезна за стимулиране на спорообразуването на спорообразуващи бактерии, такива като Bacillus sp.

За да се направи това, се засява щам от рода бацил и се инкубира в продължение на 24 часа при 37 ° С в аеробиоза. След като колониите се отглеждат, плаката се подлага на стрес от температурата, т.е. температурата на печката се увеличава до 44 ° С и се оставя за 24 часа повече или се въвежда в хладилник за 24 часа..

В края на културата, културите се удължават и оцветяват с Gram оцветяване или Шефер-Фултон спорова петна. В тях ще се наблюдават бацили с ендоспори (спори вътре в бацила) и екзоспори (спори извън бацила)..

Поддръжка на деформация

Някои изследователски лаборатории или подкрепа на университетски учение, необходима за поддържане на жизнеспособни бактерии от клинично значение за толкова дълго, колкото е възможно, за да използвате банковите бактериите (bacterioteca) за научни изследвания или за подготовка на учебни практики, при които Учениците ще се научат да манипулират и идентифицират тези микроорганизми.

За тази цел може да се използва хранителният агар, както и агар с мозъчна инфузия на сърцето. агар се получава, излива се в епруветки с капачка бакелит и постно на база, така че агара втвърдява образуващи слой на дъното и повърхността на скосяване (наклон).

Всяка епруветка е етикетирана чрез поставяне на името на бактериите, които ще бъдат засадени, и датата. На рамката всяка от бактериите ще бъде засадена и инкубирана за 24 часа, след като колониите бъдат отгледани, тръбите се съхраняват при стайна температура..

Бактериотеката трябва да се поднови от 1 до 3 месеца, за да се избегне замърсяване и дехидратация на средата, както и смъртта на бактериите..

По този начин могат да се поддържат само неизискващи бактерии.

Броят на колониите

Въпреки че има специализираните среди за колония броене като стандартен агар акаунт, хранителния агар може да се използва за тази цел, или чрез посяване повърхност с Drigalski шпатула или дълбочина. Следователно, той е много полезен при микробиологичния анализ на храната и водата.

Изпълнение на диагностични тестове

Тъй като това е среда, която не съдържа кръв, или каквато и да е друга добавка, идеално е да се вземат колонии, отгледани в тази среда, за да се извърши тестът на каталазата..

По подобен начин, поради ясния си цвят, се посочва, че тестовете за оксидаза се извършват директно върху площ от засятия агар, без да се намесва..

Възстановяване на мезофилни аеробни релаксиращи солени води (плажове)

Хранителният агар, приготвен с 10% морска вода, е полезен за оценка на мезофилни аероби в плажните води.

По този начин можем да оценим нивото на реално замърсяване, което водите имат с тези микроорганизми, тъй като при този тип проби резултатите се припокриват, когато се използват хранителни среди, приготвени по конвенционален начин..

Това беше демонстрирано от Cortez et al. през 2013 г. в изследване.

Това е разбираемо, защото на рязката промяна страда бактерии преминаващи hipersalado среда при ниска сол среда следователно микроорганизми влизат пасивно състояние, в което те са жизнеспособни, но не и да се култивира.

препратки

1. - Хранителен агар. Уикипедия, Свободната енциклопедия. 13 сеп 2016, 20:33 UTC. 29 Дек 2018, 21:04 en.wikipedia.org
2. Forbes B, Sahm D, Weissfeld А. (2009). Микробиологична диагноза на Bailey & Scott. 12 изд. Аржентина. Panamericana S.A Редакция.
3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Микробиологична диагноза. (5-то изд.). Аржентина, редакция Panamericana S.A..
4. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Влияние на културална среда, приготвена с морска вода, върху здравните показатели в морските води на минерални извори в Чичириви, Фалкон, Венецуела. Rev Soc Come Microbiol 2013; 33: 122-128
5. Paredes V, Dias V, Silva de Almeida M и Cardoso M. Микробиологично качество на водата за осеменяващи дози, за Suinos.Cient.Agro.Amaz. 2013; 1 (2): 42-49.
6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Практическа клинична микробиология. Университет на Кадис, 2-ро издание. Служба за публикации на UCA.