Основа, подготовка и употреба на агарова сол и манитол

на сол агар и манитол или солен манитол е твърда, селективна и диференциална културална среда. Тя е създадена от Чапман за изолиране на патогенни грам положителни коки, особено Staphylococcus aureus.

Въпреки това, също е полезно да се изолира Staphylococcus epidermidis, които понякога могат да присъстват като опортюнистичен патоген и Staphylococcus saprophyticus, признат като уринарен патоген, наред с други видове.

Някои ентерококи могат да растат в тази среда, както и някои грам-положителни спори-формиращи бацили.

Тази среда е много полезна при анализа на клинични проби, но се използва и при микробиологичното изследване на храни и при контрола на качеството на промишлени продукти, като козметика, лекарства и др..

Соленият манитолов агар се състои от екстракти и пептони от говеждо месо, трипфин, манитол, натриев хлорид, фенол червен и агар..

индекс

• 1 Фондация
• 2 Подготовка
• 3 Използване
• 4 Контрол на качеството
• 5 Заключителни съображения
• 6 Препратки

фундамент

Манитоловият агар е селективен благодарение на високата концентрация на сол. Солеността действа като инхибиторно вещество и предотвратява растежа на грам-отрицателните бактерии.

Също така е различно поради наличието на манитолов въглехидрат и феноловия червен рН индикатор. От това бактериите, способни да ферментират манитол, произвеждат киселини, подкисляващи средата, превръщайки колониите и средно жълтите..

От друга страна, колониите, които не ферментират манитол, растат в средата, като вземат хранителните вещества, осигурени от екстрактите и пептоните на месото и триптената. От там бактериите извличат въглерод, азот, витамини и минерали, необходими за растежа им.

Колониите в този случай могат да бъдат слаби или силно розови, а средата остава същия цвят или се променя на фуксия.

Агарът е вещество, което осигурява консистенцията на средата.

подготовка

За приготвяне на един литър солен манитол агар, 111 g от дехидратираната среда на търговския дом се претегля и се разтваря в 1000 ml дестилирана вода, като се използва фиола.

Топлината се прилага чрез често отстраняване на средата за подобряване на процеса на разтваряне. Оставете да ври за минута.

Фиола се поставя в автоклава при 121 ° С в продължение на 15 минути.

В края на времето, фиола се изважда от автоклава, оставя се да стои и се сервира между 15 и 20 ml върху стерилни петриеви блюда, когато температурата е приблизително 50 до 55 ° С..

Оставя се да се втвърди, да се нарежда в обърната форма в плакари и да се съхранява в хладилник до неговата употреба. Преди да засадите проба, трябва да изчакате табелата да поеме температурата на околната среда.

Плаките се засяват чрез накисване или сеитба на повърхността с дигалска шпатула. Крайното рН на приготвената среда трябва да бъде 7.4 ± 0.2

Цветът на дехидратираната среда е светло бежов, а цветът на подготвената среда е оранжевочервен.

приложения

Поради високата си селективност, тази среда е идеална за засаждане на проби със смесена флора, в която човек иска да търси присъствието на Staphylococcus aureus, като основен патоген на този род.

В този смисъл, една от най-честите му приложения е в микробиологичния анализ на проби на фарингеални ексудати и назални секрети, особено за откриване на асимптоматични носители на S. aureus.

Някои страни са приложили този анализ като задължително изискване за хората, които искат да работят като доставчици на храна.

Този контрол предотвратява наемането на хора, които са носители на S. aureus, като по този начин се избягва масивно хранително отравяне, поради консумацията на храни, заразени с стафилококов ентеротоксин.

Той може също да бъде включен в посяването на инфекции на рани, кръвни култури, CSF, бронхоалвеоларен лаваж, наред с други..

Соленият манитолов агар е полезен за повторно изолиране на колонии от култури на урина от CLED агар или кръвен агар, чиято грам показва Gram-положителни коки в клъстери.

Той е валиден и при микробиологичния анализ на храни, питейна вода, почви, наред с други приложения.

Контрол на качеството

След като се приготви партида от блюда със солен манитолов агар, препоръчително е да се извърши качествен контрол. Контролните щамове се засяват, за да покажат дали има растеж или не.

Като положителна контрола, известни щамове на Staphylococcus aureus. Тя трябва да расте задоволително чрез развитие на жълти колонии, а средата също става същия цвят.

По подобен начин е удобно да се включи известен щам на Staphylococcus epidermidis. Тя трябва да расте задоволително чрез развитие на розови колонии, а средата остава същия цвят или потъмнява в по-силен розов цвят.

Като отрицателна контрола се използват щамове, които не трябва да растат в тази среда. Например, можете да засадите известен щам на Escherichia coli или Klebsiella pneumoniae. Очакваният резултат е пълно инхибиране, т.е..

Освен това, трябва да се инкубира плоча без инокулация. В него не трябва да има растеж, няма промяна на цвета.

Важно е плочата да не се използва, ако има индикации за влошаване, като замърсяване, дехидратация, обезцветяване и др..

Заключителни съображения

Когато се използва осолена манитолова агарна среда, трябва да се вземат под внимание някои важни аспекти:

-Получаването на растеж на жълти колонии не показва, че е такъв Staphylococcus aureus. Трябва да се помни, че някои щамове Enterococcus могат да растат в тази среда и да ферментират манитол, както и някои грам-положителни спори-образуващи бацили..

Ето защо е важно да се извърши грам към колонията и каталазен тест.

-От друга страна, трябва да се има предвид, че други видове стафилококи се различават от останалите ауреус Също така могат да ферментират манитол. Затова е важно колонията да се култивира до хранителен бульон, който да се вземе от него и да се извърши тест за коагулаза..

Сред видовете Staphylococcus с клинично значение за мъжката ферментация на манитола са: S. aureus, S. simulans, S. capitis ssp capitis, S. capitis ssp urealyticus, S. xylosus, S. cohnii ssp urealyticum, между другото.

Други могат да дадат променлива реакция, т.е. понякога положителна, а понякога и отрицателна. Някои са S. saprophyticus, S. haemolyticus, S. warneri, S. intermedius, между другото.

-Не се препоръчва да се вземат колонии директно от манитол агар за извършване на коагулазен тест, тъй като високата концентрация на сол в средата може да повлияе на резултата..

-Накрая, препоръчително е да се инкубират плочите, засети със солен манитол, до 48 часа, поради факта, че някои щамове от S. aureus Те могат да ферментират бавно манитола, въпреки че това не е много често.

препратки

1. Laboratories Britania. Манитол солен агар. 2015. Налично на: britanialab.com
2. "Солен манитолов агар". Уикипедия, Свободната енциклопедия. 31 октомври, 2018, 19:08 UTC. 17 януари 2019, 20:55, достъпно на: en.wikipedia.org.
3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Микробиологична диагноза. (5-то изд.). Аржентина, редакция Panamericana S.A..
4. Forbes B, Sahm D, Weissfeld А. (2009). Микробиологична диагноза на Bailey & Scott. 12 изд. Аржентина. Panamericana S.A Редакция
5. BD Laboratories BD Mannitol Salt Agar. 2013. Налично на: bd.com.