Основа, подготовка и употреба на агар Salmonella-Shigella



на Salmonella-Shigella агар известен също като SS агар, е умерено селективна и диференциална среда, специално проектирана за изолиране на ентеропатогенни бактерии от родовете Salmonella и Shigella, както от екологични, така и от клинични проби..

SS агарът има сложен състав; Състои се от екстракт от месо, пептон, лактоза, жлъчни соли, натриев цитрат, натриев тиосулфат, железен цитрат, агар, неутрално червено, ярко зелено и дестилирана вода. Предвид голямата му селективност е възможно да се отглеждат проби с обилна смесена флора.

В микробиологичните лаборатории средата Salmonella-Shigella се използва широко за изследване на наличието на Salmonella и Shigella в проби от диарийни фекалии, канализация, питейна вода и храни..

Понякога е необходимо да се използват бульони преди обогатяване (бульон от лактоза) и обогатяване (бульон от селенит цистин) за възстановяване на щамовете на Salmonella.

Тези стъпки са необходими, когато съществува съмнение за наличие на Salmonella в много ниско количество или когато щамът може да бъде малтретиран от процеси, типични за промишленото производство, основно преработени храни. Също така е препоръчително да се обогатяват проби от изпражнения от пациенти, лекувани с антибиотици.

Впоследствие обогатеният бульон може да се посади върху агар Salmonella-Shigella и други подобни среди, такива като ксилозен агар, дезоксисилоксан лизин (XLD) и ентеричен хектоен агар (HE)..

индекс

  • 1 Фондация
    • 1.1 Хранителна мощност
    • 1.2 Последователност
    • 1.3 Селективни
    • 1.4 Диференциал
  • 2 Подготовка
  • 3 Използвайте
  • 4 Ограничения
  • 5 Контрол на качеството
  • 6 Препратки

фундамент

Всеки компонент на културалната среда на Salmonella-Shigella има специфична функция, а сместа като цяло му придава свойства, които го характеризират..

Хранителна сила

Екстрактът от месо и пептон (смляна казеин и животински тъкани) осигуряват необходимите хранителни вещества (азоти, въглерод и витамини) за развитието на микроорганизми, способни да понасят останалите компоненти.

съгласуваност

Агар-агарът е отговорен за осигуряване на твърда консистенция на средата.

селективен

Тази среда е силно селективна, защото съдържа жлъчни соли, натриев цитрат и ярко зелено. Следователно, той инхибира растежа на всички Грам-положителни бактерии и повечето от Грам-отрицателните бацили, включително някои колиформи.

Докато бактериите от рода Salmonella и някои щамове на Shigella поддържат тези съединения.

Основно, родът Salmonella е много устойчив на жлъчни соли, толкова много, че те са способни да живеят в жлъчния мехур на някои пациенти, превозващи постоянно, които изхвърлят бактериите през изпражненията..

диференциал

Лактозата е ферментиращият въглехидрат, който помага да се диференцират щамовете на ферментация на лактоза от неферментиращите щамове. Това свойство се доказва от наличието на рН индикатор, който в тази среда е фенолово червено.

Ферментиращите щамове лактоза дават червени колонии, докато неферментиращите щамове са безцветни. Тази характеристика е важна, тъй като Salmonella и Shigella не ферментират лактозата.

От друга страна, тази среда съдържа натриев тиосулфат като източник на сяра и железен цитрат като източник на желязо. И двете съединения са в състояние да диференцират бактериите, способни да произвеждат сероводород. Те реагират, за да образуват черна утайка от неразтворим и видим железен сулфид.

Този имот има някои щамове от рода Salmonella. Обикновено техните колонии са безцветни плоски с черна точка в центъра на нея. Останалите салмонели не произвеждат Н2S и се развиват като безцветни колонии.

От друга страна, колониите от рода Shigella са безцветни плоски без почерняване.

подготовка

Това означава, че е много лесно да се подготви.

Претеглят се 63 g от дехидратираната търговска среда и се разтварят в един литър дестилирана вода. Разтворът се загрява и се разбърква. Сместа може да достигне до кипене до минути.

Тази среда не трябва да се автоклавира. След разтварянето му се сервира директно върху единични или двойни стерилни плаки.

Когато се втвърдяват, те се подреждат по обратен начин в създателите на плаки и се съхраняват в хладилник (2-8 ° C), докато се използват.

Средата след приготвяне трябва да бъде рН 7.2 ± 0.2 и оранжево червено.

Важно е да се позволи на плочите да бъдат темперирани преди сеитбата на пробите. Можете директно да семената на оригиналната проба, изхвърляне на материал върху част от агар и след това от там striate от изтощение.

В случай на използване на обогатени бульони, преминават част от селенитния бульон и сеят с дигалска шпатула.

Инкубирайте при 37 ° С в продължение на 24 часа при аеробиоза.

Имайте предвид, че количеството грамове за претегляне и крайното рН на средата може да варира от една търговска къща до друга. Основната плоча на средата винаги носи показанията за нейното приготвяне.

употреба

Често се използва при анализа на културите на изпражнения и при микробиологичното изследване на проби от остатъчни води, питейна вода и храна.

Често се приготвят двойни плаки, от едната страна се поставя агарът Salmonella-Shigella, а от другата страна на агара XLD..

ограничения

-Някои щамове Shigella не растат в тази среда. Следователно, не се препоръчва за първична изолация на този род.

-Не всяка ясна колония с черен център е показателна за Salmonella; трябва да се извършат биохимични тестове, за да се направи правилна идентификация, тъй като колониите на някои щамове на Proteus не се различават от тези на Salmonella.

-Дехидратираната среда трябва да бъде внимателна при излагане на околната среда, тъй като е много хигроскопична. Затова трябва да се съхранява в суха и добре затворена среда. Отворено за много кратки периоди.

-С течение на времето жлъчните соли в средата могат да се утаят, образувайки образ, подобен на сплетения в агара, но това не влияе на резултатите.

-Някои щамове на Shigella могат бавно да ферментират лактозата.

Контрол на качеството

За да се докаже, че средата работи правилно, препоръчително е да се засаждат известни или сертифицирани контролни щамове и да се наблюдава дали растежът отговаря на очакваните характеристики.

За тази цел, щамове на Е. coli, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium или Enterococcus faecalis.

Очакваните резултати са:

Escherichia coli --розови изпъкнали колонии.

Enterobacter и Klebsiella- големи колонии и червена или розова мукоида.

Shigella flexneri --прозрачни или безцветни плоски колонии.

Salmonella typhimurium - безцветни колонии с черен център.

Enterococcus faecalis-- пълно инхибиране.

препратки

  1. Difco Francisco Soria Melguizo Laboratories. Salmonella-Shigella агар. 2009. Налично на: f-soria.es
  2. BD Laboratory. BD Salmonella-Shigella агар. 2013. Налично на: bd.com
  3. Laboratories Britania. Salmonella-Shigella агар. 2015. Налично на: britanialab.com
  4. Диагностика на Valtek. Salmonella-Shigella агар (SS агар) .2010. Достъпни на: andinamedica.com
  5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld А. (2009). Микробиологична диагноза на Bailey & Scott. 12 изд. Редакция Panamericana S.A. Аржентина.
  6. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Микробиологична диагноза. 5-то изд. Редакция Panamericana S.A. Аржентина.