Ярка зелена агарова основа, подготовка и употреба



на ярко зелен агар тя е твърда хранителна среда с висока степен на селективност. Използва се изключително за изолиране на щамове от рода Salmonella, но има някои изключения, като видовете тифи и паратифи, които не растат в тази среда.

Търсенето на рода Salmonella е често срещано в проби от фекалии, вода или храна. В този смисъл тази среда може да бъде много полезна. Този агар е създаден през 1925 г. от Кристенсен, Лестър и Юргенс, по-късно модифициран от Кауфман.

Състои се от плурипептони от пептично храносмилане на животински тъкани и панкреатично разграждане на казеин, също така съдържа дрождев екстракт, натриев хлорид, лактоза, захароза, фенол червен, ярко зелен и агар-агар..

Характеризира се с това, че е много негостоприемна среда за повечето бактерии, благоприятстващ растежа на Salmonella, но някои колиформи са способни да съществуват в него, развивайки се слабо.

Важно е да се подчертае, че в тази среда родът на Shigella не расте и нито един Salmonella typhimurium, или Salmonella paratyphi. Следователно, ако е желателно да се изолират тези микроорганизми, трябва да се използват и други средства, като XLD агар, между другото..

индекс

  • 1 Фондация
    • 1.1 Яркозелен агар
    • 1.2 Варианти на яркозелен агар (BGA)
  • 2 Подготовка
  • 3 Употреби / приложения
  • 4 Контрол на качеството
  • 5 Препратки

фундамент

Яркозелен агар

Всеки от компонентите, съставляващи средата, има специфична функция, която определя характеристиките и свойствата на агара.

Плирипептоните и екстрактът от дрожди са източник на хранителни вещества, от които микроорганизмите вземат азота и минералите, необходими за тяхното развитие. Лактозата и захарозата са енергийни източници за микроорганизми, които могат да ги ферментират.

Яркозеленото е инхибиращото вещество, което предотвратява развитието на грам-положителни бактерии и голям брой грам-отрицателни микроорганизми..

Натриевият хлорид осигурява осмотична стабилност на средата. Докато феноловото червено е индикатор за рН, то се оцветява при откриване на производството на киселини от ферментацията на въглехидрати.

Неферментиращите колонии от лактоза и захароза растат в тази среда с бял цвят, розово или прозрачно, на червен фон. Например, бактерии от рода Salmonella.

Докато бактериите, които ферментират лактоза или захарозата, могат да растат в тази среда, те развиват зеленикаво-жълти или зеленикаво-жълти колонии на жълто-зелен фон. Например, Escherichia coli и Klebsiella pneumoniae.

Варианти на яркозелен агар (BGA)

Има и други варианти на яркозелен агар; новобиоцин зелен агар ярка глюкоза (NBG) и новобиоцин агар ярко зелен глицерол лактоза (NBGL).

Новобиоцин агар ярко зелен глюкоза (NBG)

Съдържа соев агар триптиказа, железен амониев цитрат, натриев тиосулфат пентахидрат, фенол червен, глюкоза, ярко зелен, новобиоцин и дестилирана вода.

Служи за изолиране на колонии от Salmonella от проби от изпражненията.

В този случай светло зелено и новобиоцин са инхибиращите вещества, които предотвратяват растежа на грамположителните бактерии и някои грам отрицателни микроорганизми..

Натриевият тиосулфат е източник на сяра, а железният цитрат е източник на желязо, както необходимо, за да се разкрие производството на сероводород чрез образуването на черна утайка от железен сулфид..

Глюкозата е ферментиращият въглехидрат, а феноловото червено е рН-индикатор.

В тази среда колониите на Salmonella се развиват големи с черен център, заобиколен от червеникав ореол и последван от ясно видима област. Някои щамове на Citrobacter freundii произвеждат колонии, идентични на Salmonella.

Гликолин лактоза на новобиоцин ярко зелен (NBGL)

Тази среда съдържа соев агар триптиказа, железен амониев цитрат, натриев тиосулфат, лактоза, глицерол, ярко зелен, новобиоцин и дестилирана вода..

Разликата на тази среда с предходната е, че глюкозата се заменя с лактоза, а глицеролът и феноловото червено не се използва..

Средата се използва и за изолиране на видовете Salmonella, колониите се развиват в черно чрез производството на сероводород.

Само колонии, които не произвеждат киселина от глицерол или лактоза, постигат производство на Н2Това е достатъчно, защото ниското рН влияе върху образуването на Н2Това води до безцветни колонии за повечето видове Proteus и Citrobacter.

подготовка

-Претеглят се 58 грама от търговско получената дехидратирана среда. Добавя се в литър двойно дестилирана вода. Смесете, оставете да престои няколко минути и подгответе препарата до източник на топлина, докато се разтвори напълно.

-Автоклавирайте при 121 ° C за 15 минути, не превишавайте времето за стерилизация.

-Оставете да стои и да служи дори горещо в стерилни Петри ястия. Крайното рН трябва да бъде 6.9 ± 0.2.

-Оставя се да се втвърди и да се съхранява в хладилник до употреба. Преди да засадите плочите трябва да приемат стайна температура.

-Прахообразната среда е зелена и готова да приеме оранжево-кафяв или червеникаво-зелен цвят, в зависимост от pH и търговската къща. Много кафяв цвят показва, че агарът е прегрял.

-След като агарът се втвърди, не се препоръчва преработване, тъй като средата се влошава.

Употреби / приложения

Тази среда се използва за търсене на щамове от рода Salmonella от проби на изпражнения и млечни храни, наред с други..

Тъй като това е доста негостоприемна среда, препоръчително е да се засади богат инокулум, ако се използва директна проба. В противен случай, предварителното обогатяване и обогатяване на пробите трябва да се извърши преди засаждане в тази среда.

Тъй като някои щамове на Salmonella са инхибирани или нарастват трудно, препоръчително е да се придружава тази среда с други селективни агари за Salmonella.

Всички колонии с характерни салмонела трябва да бъдат подложени на биохимични тестове за окончателна идентификация.

Контрол на качеството

За да се тества доброто функциониране на ярко зелената агарова среда, щамовете АТСС могат да се използват за наблюдение на развитието на същите върху него..

Най-честите щамове, използвани за контрол на качеството, са: Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Proteus mirabilis ATCC 43071, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Escherichia coli ATCC 25922,  Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538.

Първите 3 трябва да дават розови или прозрачни бели колонии на червен фон. Salmonella с добро развитие и Proteus с оскъден или редовен растеж.

Klebsiella и Escherichia се очакват жълтеникаво-жълти колонии с жълт фон и в случай на Shigella и Staphylococcus трябва да се инхибират..

Дехидратираната среда трябва да се съхранява на стайна температура, на сухо място, тъй като средата е много хигроскопична.

препратки

  1. Difco Francisco Soria Melguizo Laboratory S.A. Блестящ зелен агар. 2009
  2. Британска лаборатория Ярко зелен агар. 2015.
  3. BD Laboratory. BD Brilliant Green Agar. 2013.
  4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Микробиологична диагноза. (5-то изд.). Аржентина, редакция Panamericana S.A..
  5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. 2009. Микробиологична диагноза на Bailey & Scott. 12 изд. Аржентина. Panamericana S.A Редакция