Соев бульон tripticaseína основа, подготовка и употреба

на соев бульон tripticaseína Тя е течна културална среда, много питателна и неселективна. Поради голямата му гъвкавост, тя е една от най-широко използваните течни културални среди в микробиологичната лаборатория.

Известен е също като бульон триптикаса соя или усвоен казеин-соя, чието съкращение е TSB за неговото съкращение на английски Триптичен съм Бульон или CST за акронима на испански. Използването му е много разнообразно поради неговия състав. Състои се от триплей, соев пептон, натриев хлорид, дикалиев фосфат и глюкоза.

Той е способен да възпроизвежда клинично важни патогенни бактерии, включително тези, които са хранително-взискателни и анаеробни бактерии. Някои опортюнистични гъби и замърсители също могат да се развият в тази среда.

Поради високата си хранителна сила, той е с висока чувствителност за откриване на микробно замърсяване, поради което е избран от Службата за инспекция на животни и растения на USDA за микробиологичен анализ на ваксини..

Също така, соевата супа от триптиказа отговаря на изискванията на различните фармакопеи (Европейски ЕП, Японски JP и Северна Америка) за микробиологично изследване на продукти на промишлено ниво, като козметика и храни..

От друга страна, заслужава да се отбележи, че въпреки голямата си полезност, тази среда е сравнително евтина, така че е достъпна за повечето микробиологични лаборатории. Също така е много лесно да се приготви.

индекс

• 1 Фондация
• 2 Подготовка
  • 2.1 Соя от триптикамин
  • 2.2 -Варианти на соев бульон триптиказеин
• 3 Използвайте
• 4 Размножена
• 5 Контрол на качеството
• 6 Ограничения
• 7 Препратки

фундамент

Tripteína, пептонът и глюкозата му осигуряват основните хранителни свойства, които го превръщат в идеална среда за бързо микробно развитие..

Приблизително 6 до 8 часа инкубация вече може да се наблюдава растеж в повечето микроорганизми. Въпреки това, има бавно растящи щамове, които могат да продължат да растат дни.

Натриев хлорид и дикалиев фосфат действат съответно като осмотично равновесие и рН регулатор. Наличието на растеж се доказва от появата на мътност в средата; ако няма растеж, средата остава полупрозрачна.

Благодарение на своя светъл цвят е възможно да се наблюдава производството на пигменти, като например показаното на изображението, намиращо се в началото на изделието, което съответства на пигмента, произведен от Pseudomonas aeruginosa. 

подготовка

-Триптичен соев бульон

За да се приготви трифтаза соев бульон, се претегля 30 грама от дехидратираната търговска среда в цифров мащаб. След това се разтваря в литър дестилирана вода, съдържаща се във фиола.

Сместа се оставя да престои 5 минути и след това се довежда до източник на топлина, за да се подпомогне разтварянето на средата. Трябва да се разклаща често, докато кипи 1 минута.

Веднъж разтворен, той се разпределя в тръби с подходящ размер, ако е необходимо. Може да се използват тръби с памучен тампон или бакелитови капачки. След това епруветките се стерилизират със средата в автоклава при 121 ° С за 15 минути.

РН на средата трябва да бъде 7,3 ± 0,2

Трябва да се има предвид, че цветът на дехидратираната хранителна среда е светло бежова и трябва да се съхранява при температура от 10 до 35 ° С на сухо място. Докато приготвеният бульон е светлокафяв и трябва да се съхранява в хладилник (2 до 8 ° C).

-Вариации на соев бульон триптиказеин

Триптикамин модифициран соев бульон може да бъде приготвен чрез добавяне на жлъчни соли и новобиоцин, за да се направи селективен за изолиране на Е. coli. Друга възможност за същата цел е да се приготви соев триптиказен бульон, допълнен с ванкомицин, цефиксим и телурит (2,5 μg / ml)..

От друга страна, повече глюкоза (0.25%) може да се добави към соевия бульон триптиказеин, когато целта е да се стимулира образуването на биофилм..

употреба

Той е достатъчно питателен, за да позволи растежа на взискателни или досадни бактерии, като например Streptococcus pneumoniae, Streptococcus sp и Brucella sp, няма нужда да се допълва с кръв или серум.

По същия начин, някои гъби могат да се развият в този бульон, като например Комплексът Candida albicans, Aspergillus sp и Histoplasma capsulatum.

В допълнение, тази среда при анаеробни условия е идеална за възстановяване на бактерии, принадлежащи към рода Clostridium, както и на анаеробни неспорулиращи бактерии с клинично значение..

Ако се добави 6.5% натриев хлорид може да се използва за растежа на Enterococcus и други стрептококи от група D.

На изследователско ниво, той е много полезен в различни протоколи, особено в изследването на бактерии, които образуват биофилми или биофилми. Използва се също за приготвяне на бактериална суспензия при 0,5% от Mac Farland, необходима за извършване на антибиограмата по метода на Kirby and Bauer..

В този случай се взимат от 3 до 5 колонии с подобен вид и се емулгират в 4-5 ml соев бульон триптиказеин. След това се инкубира в продължение на 2 до 6 часа при 35-37 ° С и след това се регулира до желаната концентрация като се използва стерилен физиологичен разтвор. Триптиказният соев бульон не трябва да се използва за 18 до 24 часа инкубация.

засадени

Пробата може да се засява директно или да се култивира в чисти колонии, взети от селективна среда. Инокулумът трябва да бъде малък, за да не замъгли средата преди инкубацията.

Обикновено се инкубират при 37 ° С в аеробиоза за 24 часа, но тези условия могат да варират в зависимост от търсения микроорганизъм. Той може също да бъде инкубиран в анаеробни условия при 37 ° С в продължение на няколко дни, ако е необходимо. Например, при взискателни или бавно растящи микроорганизми могат да се инкубират до 7 дни.

При микробиологичния анализ на фармацевтични вещества - като ваксините - протоколите са по-строги. В тези случаи бульонът без растеж не се изхвърля, докато не достигне 14 дни непрекъсната инкубация.

Контрол на качеството

За всяка приготвена партида, 1 или 2 епруветки трябва да се инкубират без инокулация, за да се демонстрира стерилност. Тя трябва да остане непроменена.

Можете също да засадите известни щамове, за да оцените тяхното поведение. Сред щамовете, които могат да бъдат използвани са:

Aspergillus brasiliensis ATCC 1604, Candida albicans ATCC 10231, Bacillus subtilis ATCC 6633, Staphylococcus aureus ATCC 6538 или 25923, Escherichia coli ATCC 8739,  Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Salmonella typhimurium ATCC 14028.

Във всички случаи растежът трябва да бъде задоволителен при условия на атмосфера и температура, подходящи за всеки микроорганизъм.

ограничения

-Ферментацията на глюкоза води до намаляване на рН на средата чрез производството на киселини. Това може да е неблагоприятно за оцеляването на някои микроорганизми, чувствителни към киселинност.

-Не се препоръчва за поддържане на щамове, тъй като в допълнение към киселинността, след няколко дни бактериите изчерпват хранителните вещества с последващото натрупване на токсични вещества, които правят околната среда негостоприемна..

-Трябва да се внимава за всички протоколи за стерилност, тъй като бульоните са лесно замърсени.

-След приготвяне на триптиказенови соеви бульони не се опитвайте да прехвърляте бульон в друга стерилна епруветка, тъй като този вид маневри е много уязвим за заразяване..

препратки

1. Кона Е. Условия за добро проучване на чувствителността чрез агар дифузионен тест. Rev. chil. infectol. 2002; 19 (2): 77-81. Достъпни на: scielo.org
2. Британска лаборатория Триетинов соев бульон. 2015. Налично на: britanialab.com
3. MCD Laboratory. Триешки соев бульон. Предлага се на адрес: electronic-systems.com
4. Neogen лаборатория. Триптих от соев бульон. Предлага се на адрес: foodsafety.neogen.com
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld А. (2009). Микробиологична диагноза на Bailey & Scott. 12 изд. Редакция Panamericana S.A. Аржентина.
6. Рохас Т, Васкес Й, Рейес Д, Мартинез С, Медина Л. Оценка на техниката на магнитното имуноразпределение за възстановяване на Escherichia coli O157: H7 в млечни кремове. Алън. 2006; 56 (3): 257-264. Достъпни на: scielo.org.ve
7. Гил М, Мерчан К, Кеведо Г, Санчес А, Никита Г, Рохас Т, Санчес Дж, Финол М. Образуване на биофилм в изолирани Staphylococcus aureus според антимикробната чувствителност и клиничния произход. Vitae. 2015; 62 (1): 1-8. Предлага се на адрес: saber.ucv.ve
8. Narváez-Bravo C, Carruyo-Núñez G, Морено М, Rodas-González A, Hoet A, Wittum T. Изолиране на Escherichia coli O157: H7 в проби от изпражнения на говеда от двойно предназначение от община Миранда, щат Zulia, Венецуела. Rev. Cient. (Маракайбо), 2007 г .; 17 (3): 239-245. Достъпни на: scielo.org